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一個車子在荒涼鄉間道路拋錨的迷途夜晚，即將變成一對婚姻陷入瓶頸夫妻，怎麼都無法想像的恐佈夢魘…黑暗而偏僻的公路上，孤立無援的大衛福克斯（歐文威爾森 飾）和即將離婚的妻子艾美（凱特貝琴薩 飾），被迫住進一間由古怪老闆（法蘭克華利 飾）經營的低級旅館。這對夫妻不斷爭吵間，意外在他們污穢而破舊的房間裡，發現一捲乍似實境錄影的虐殺影帶，並察覺這部血腥影片，竟然就在他們所住的房間中拍攝…大衛和艾美知道，如果不拋開歧見攜手合作的話，兩人都將成為下一個受害者。

在兒子意外死亡後，大衛和艾美的婚姻徹底崩潰。在離婚前最後一次共同旅途的回程上，大衛闖進一條陌生而了無人煙的捷徑。車子意外拋錨後，他們別無選擇地住進鄰近唯一的旅社，而該旅社的古怪夜班經理曼森，對看殘忍恐怖片的興致，似乎遠比幫他們解決引擎問題來得高昂。

這對夫妻忍耐著和彼此共處一室，度過這個氣氛緊繃而不快的夜晚。但他們拉下破舊床罩不久，隔壁就傳來發狂似的撞擊聲。當他們向曼森抱怨這個情形時，曼森卻說他們兩人是旅館唯一個顧客，解釋道那些噪音，可能是流浪漢想要破門闖入而引起的。

為了放鬆不安而無助的情緒，大衛索性看起在房間裡找到那些沒有標示內容的錄影帶，卻發現影帶的內容，竟是一部部極度寫實的低成本虐殺影片。幾分鐘後，大衛在逐漸高漲的恐懼中意識到，這些影帶中殘忍的暴力行為，並非在演戲，而這間安裝多部隱藏攝影機的「蜜月套房」，就是這病態而致命貓捉老鼠遊戲的場地。

大衛和艾美知道這些嗜血的殺人狂，正企圖將自己變成下一部謀殺影帶的主角。但在他們使盡全力逃亡時，卻發現這些人正拍攝著他們的一舉一動，玩弄他們以增加虐殺影片的吸引力。隨著敵人快速的逼近，大衛和艾美知道，他們必需依靠彼此，才有機會在這個他們生命中最長的一夜生存下來